MPN記數法
一、實驗目的
通過對好氣性自生固氮菌的計數,了解稀釋培養計數(MPN)的原理和方法。
二、實驗原理
最大或然數(most probable number,MPN)計數又稱稀釋培養計數,適用於測定在一個混雜的微生物群落中雖不佔優勢,但卻具有特殊生理功能的類群。其特點是利用待測微生物的特殊生理功能的選擇性來擺脫其他微生物類群的干擾,並通過該生理功能的表現來判斷該類群微生物的存在和豐度。本法特別適合於測定土壤微生物中的特定生理群(如氨化、硝化、纖維素分解、固氮、硫化和反硫化細菌等的數量和檢測污水、牛奶及其他食品中特殊微生物類群(如大腸菌群)的數量,缺點是只適於進行特殊生理類群的測定,結果也較粗放,只有在因某種原因不能使用平板計數時才採用。
MPN計數是將待測樣品作一系列稀釋,一直稀釋到將少量(如lm1)的稀釋液接種到新鮮培養基中沒有或極少出現生長繁殖。根據沒有生長的最低稀釋度與出現生長的最高稀釋度,採用“最大或然數”理論,可以計算出樣品單位體積中細菌數的近似值。具體地說,菌液經多次10倍稀釋後,一定量菌液中細菌可以極少或無菌,然後每個稀釋度取3—5次重複接種於適宜的液體培養基中。培養後,將有菌液生長的最後3個稀釋度(即臨界級數)中出現細菌生長的管數作為數量指標,由最大或然數表上查出近似值,再乘以數量指標第一位數的稀釋倍數,即為原菌液中的含菌數。
資料來源: http://wenku.baidu.com/view/d9a00a335a8102d276a22fc2.html
通過對好氣性自生固氮菌的計數,了解稀釋培養計數(MPN)的原理和方法。
二、實驗原理
最大或然數(most probable number,MPN)計數又稱稀釋培養計數,適用於測定在一個混雜的微生物群落中雖不佔優勢,但卻具有特殊生理功能的類群。其特點是利用待測微生物的特殊生理功能的選擇性來擺脫其他微生物類群的干擾,並通過該生理功能的表現來判斷該類群微生物的存在和豐度。本法特別適合於測定土壤微生物中的特定生理群(如氨化、硝化、纖維素分解、固氮、硫化和反硫化細菌等的數量和檢測污水、牛奶及其他食品中特殊微生物類群(如大腸菌群)的數量,缺點是只適於進行特殊生理類群的測定,結果也較粗放,只有在因某種原因不能使用平板計數時才採用。
MPN計數是將待測樣品作一系列稀釋,一直稀釋到將少量(如lm1)的稀釋液接種到新鮮培養基中沒有或極少出現生長繁殖。根據沒有生長的最低稀釋度與出現生長的最高稀釋度,採用“最大或然數”理論,可以計算出樣品單位體積中細菌數的近似值。具體地說,菌液經多次10倍稀釋後,一定量菌液中細菌可以極少或無菌,然後每個稀釋度取3—5次重複接種於適宜的液體培養基中。培養後,將有菌液生長的最後3個稀釋度(即臨界級數)中出現細菌生長的管數作為數量指標,由最大或然數表上查出近似值,再乘以數量指標第一位數的稀釋倍數,即為原菌液中的含菌數。
資料來源: http://wenku.baidu.com/view/d9a00a335a8102d276a22fc2.html